Tout d'abord, le temps de centrifugation
La durée de la centrifugation est un facteur très important qui affecte l’effet centrifuge. Le temps de centrifugation requis pour différentes méthodes de centrifugation sera différent. Ce qui suit est une introduction détaillée à la centrifugation différentielle et à la centrifugation à gradient de densité égal et à la centrifugation à gradient de densité. Pour une centrifugation différentielle, le temps de centrifugation correspond au temps où une certaine particule se dépose complètement au fond du tube de centrifugation; pour la centrifugation à gradient d'iso-densité, le temps de centrifugation se réfère au temps d'équilibre auquel la particule atteint complètement le point d'iso-densité; Le temps de centrifugation d'une centrifugation à gradient de densité fait référence au temps nécessaire pour former une zone bien définie. Pour les deux dernières méthodes de centrifugation, le temps requis pour la formation de la zone ou le temps d'équilibre est compliqué et peut être déterminé après le test.
Deuxièmement, la vitesse centrifuge
La vitesse de rotation de la centrifugeuse est principalement déterminée par la vitesse de rotation du rotor et le rayon de rotation des particules. Lors de la description des conditions centrifuges, il est souvent exprimé par le champ de force centrifuge relatif. Dans le travail réel, les données du champ de force centrifuge se rapportent à la valeur moyenne, c'est-à-dire, se réfèrent au champ de force centrifuge des particules au point dans la solution de centrifugation.
Troisièmement, le pH et la température du milieu de centrifugation
La valeur du pH du milieu de centrifugation est généralement définie dans la plage de pH dans laquelle l'enzyme est stable. Une solution tampon peut être utilisée. Lors du test, la pesée est effectuée et l'environnement de la centrifugeuse elle-même est corrodé en évitant l'environnement de peracide ou de sur-base.
Lors du travail avec une centrifugeuse, en plus de prêter une attention particulière au choix du milieu centrifuge, nous devons également contrôler la température et le pH de la solution de milieu pour éviter l'agglutination, la dénaturation et la désactivation des substances séparées. Nous allons contrôler la température de centrifugation à environ 4 ° C. Pour certaines enzymes ayant une bonne stabilité thermique, la centrifugation peut également être effectuée à température ambiante.